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帶你了解PCR基因擴(kuò)增儀常見故障及診斷

更新時(shí)間:2021-05-21點(diǎn)擊次數(shù):1930
   PCR基因擴(kuò)增儀是為滿足當(dāng)今分子生物實(shí)驗(yàn)室的需求所設(shè)計(jì)。高品質(zhì)的光學(xué)器件、可靠的溫度控制系統(tǒng)及嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝確保儀器可靠性、精度和準(zhǔn)確度。
  PCR基因擴(kuò)增儀主要功能包括多通道qPCR檢測,熔解曲線及數(shù)據(jù)分析管理等。儀器可以使用條形管或單個(gè)PCR管進(jìn)行PCR反應(yīng)。基于Android的操作系統(tǒng),所有的儀器設(shè)置和分析功能,均受控于一個(gè)直觀的、易于使用的軟件界面,可進(jìn)行快速實(shí)驗(yàn)設(shè)置和數(shù)據(jù)分析。每個(gè)熱循環(huán)后,所有樣品的熒光強(qiáng)度與循環(huán)次數(shù)顯示不斷更新。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后報(bào)告可以使用Excel軟件導(dǎo)出和分析。
  PCR技術(shù)的本質(zhì)是體外核酸擴(kuò)增,加熱使雙鏈DNA解開螺旋,在退火溫度條件下引物同模板DNA雜交,在TaqDNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合適pH緩沖液存在條件下延伸引物,重復(fù)“變性→退火→引物延伸”過程至25~40個(gè)循環(huán),呈指數(shù)級擴(kuò)大待測樣本中的核酸拷貝數(shù)。
  PCR基因擴(kuò)增儀常見故障
  ①熒光染料污染樣品孔;
  ②PCR管融化,原因可能是溫度傳感器出問題或是熱蓋出問題;
  ③個(gè)別孔擴(kuò)增效率差異很大,可能的原因是半導(dǎo)體模塊出現(xiàn)壞點(diǎn);
  ④熒光強(qiáng)度減弱或不穩(wěn)定,產(chǎn)生的原因有濾光片發(fā)霉或有水汽,或光源損耗(以鹵鎢燈為光源的),需更換光源;或需調(diào)節(jié)檢測元件靈敏度;
  ⑤儀器工作時(shí)出現(xiàn)噪音。
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