青蒿素與菌液測(cè)定的前世今生

菌體的生長情況可用OD600初步判斷菌落生長情況并間接測(cè)定菌落的密度,

是因?yàn)槟程囟úㄩL下，菌懸液的細(xì)胞濃度僅在一定的范圍內(nèi)與對(duì)應(yīng)的吸光度值呈正比關(guān)系，不同的是，針對(duì)非球狀的放線菌和某些霉菌等以及培養(yǎng)基中有其他渾濁物質(zhì)則不能通過該方法推斷濃度。

如果菌液OD600在0.6-0.8之間，表明細(xì)菌處于旺盛生長的對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞生長，OD600>3表明細(xì)菌已經(jīng)飽和等，這些僅僅是粗略估計(jì)菌落的生長情況。

想要知道較為的菌落濃度，需要將制備好的菌懸液梯度稀釋后，以未加菌液的培養(yǎng)基做空白對(duì)照，使用分光光度計(jì)分別測(cè)定OD600；并用平板計(jì)數(shù)法計(jì)算菌落總數(shù)。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，來推算未知濃度菌液的生長狀態(tài)。

若某一菌液的OD值為負(fù)，可能是細(xì)菌與培養(yǎng)基發(fā)生變色反應(yīng)，顏色的改變影響吸光度數(shù)值。菌液在測(cè)定前保持懸浮狀態(tài)能夠保證測(cè)定的準(zhǔn)確性。

由于600nm處對(duì)濁度的敏感度高，常用600nm為檢測(cè)波長，也可以對(duì)菌液進(jìn)行全波長掃描，在其大吸收峰波長下進(jìn)行測(cè)定。